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  • 2022

    4-30

    名稱:實驗動物的取血關鍵詞:動物,取血,方法目的:規范實驗動物(家兔、狗,豚鼠)取血的方法和途徑,主體內容:(一)家兔1.耳緣靜脈取血法選好耳緣靜脈,拔去被毛,用二甲苯或酒精涂擦局部,小血管夾夾緊耳根部,使血管充血擴張。術者持粗針頭從耳尖部血管,逆回流方向刺入靜脈內取血,或用刀片切開靜脈,血液自動流出,取血后棉球壓迫止血,取血量2~3ml。壓住側支靜脈,血液更容易流出;取血前耳緣部涂擦液體石蠟,可防止血液凝固。2.耳中央動脈取血法家兔固定箱內,用手揉擦耳部,使中央動脈擴張。左...

  • 2022

    4-30

    實驗方法原理藥物半數致死量LD50是指藥物急性毒性實驗中,當動物死亡率為50%時的單次給藥劑量,單位通常為mg/kg。例如,當某藥物給予400mg劑量時,可致使一半家兔(體重約為4kg)死亡,則其LD50值為100mg/kg。LD50值通常反映藥物急性毒性的大小。藥物的急性毒性、慢性毒性實驗同屬于一般毒理學的研究范疇。此外,藥物毒理學研究尚包括特殊毒理學(致癌、致畸、致突變)、藥物依賴性及過敏反應實驗等。各種屬動物均可用于藥物LD50值的測定,通常使用嚙齒類動物(大鼠和小鼠)...

  • 2022

    4-30

    【實驗目的】1.學習大鼠胃潰瘍(gastriculcer)模型建立的方法。2.觀察藥物對實驗性胃潰瘍的防治作用。3.了解組織切片和HE染色方法。【實驗原理】消化性潰瘍(pepticulcer)是由多種因素引起的一種常見病。正常情況下,機體有胃黏液、胃黏膜屏障(mucosalbarrier)、黏膜細胞更新以及胃、十二指腸節律性運動功能等一系列保護性機理,使胃、腸黏膜不受損傷。但過度的精神緊張、情緒激動,會使神經系統和內分泌功能紊亂;飲食失調,如粗糙食物,骨刺等對黏膜的物理性損害...

  • 2022

    4-30

    實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒RNA提取試劑盒熒光定量PCRMixTRIZOLdNTP氯仿逆轉錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚蘭儀器、耗材離心管離心機風光光度計電泳槽凝膠板RealtimePCR儀一、樣品RNA的抽提1.取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。2.兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃...

  • 2022

    4-23

    ELISA實驗因靈敏度高,特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可,但對初學者而言,如不注意實驗操作過程中的各個環節,可能會對最終的實驗結果產生比較大的影響,比如實驗出現白板,顯色弱靈敏度低,花板無梯度背景高等現象。下面對以上實驗現象進行一一解析。1.白板現象在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現。出現該現象的可能原因:試劑已過保質期,不同批次稀釋液交叉使用。錯加漏加檢測A,檢測B或者底物溶液TMB。洗板或者加樣過程中,酶標記物被污...

  • 2022

    4-23

    吉姆薩染液由天青,伊紅組成。染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。但本法對細胞核和寄生蟲著色較好,結構顯示更清晰,而胞質和中性顆粒則著色較差。基本方案實驗材料原位雜交玻片試劑、試劑盒吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯儀器、耗材染色盤培養箱濾紙實驗步驟1.將顯影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盤中。(1)1個盤:pH6.810mmol/l磷酸鈉緩沖液,所配的25倍稀釋的吉姆薩染液。(2)3個盤:水。(3)脫水系列溶液:①3個盤:分別盛50%、70%和95%乙醇。②2個盤:盛有...

  • 2022

    4-23

    蛋白提取組織樣本總蛋白提取(小鼠肝組織)1、頸椎脫臼處死小鼠,75%乙醇擦拭皮膚,剪開腹腔,剪切肝臟組織。2、平皿中放入6ml預冷0.9%NaCL。3、稱取0.6g左右肝組織,在平皿中剪碎組織,并轉移到勻漿器。4、預冷裂解液中添加PMSF(20ug/2ml)。5、取2ml預冷裂解緩沖液,迅速加入勻漿器,冰浴條件下充分研磨。6、組織研磨液轉移至1.5ml離心管。7、4℃,15000rpm,離心10min。8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。9、進行蛋白定量,-80...

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