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單精子注射實驗

簡要描述:單精子注射實驗(ICSI) 是一種顯微操作輔助生殖技術,通過物理方式將單個精子直接注入成熟卵母細胞的胞質內,強制完成受精過程。

  • 更新時間:2025-07-17
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詳細介紹

一、技術定義與核心原理

單精子注射(ICSI) 是一種顯微操作輔助生殖技術,通過物理方式將單個精子直接注入成熟卵母細胞的胞質內,強制完成受精過程。其核心原理包括:

  1. 繞過自然受精屏障

    • 規避精子獲能、頂體反應及卵膜穿透等自然步驟,直接解決精子活力低下、形態異常或卵母細胞膜穿透障礙等問題。

  2. 精卵強制融合

    • 通過顯wei針機械刺激卵母細胞,激活鈣振蕩信號通路,啟動胚胎發育。

  3. 遺傳物質高效利用

    • 單精子即可完成受精,顯著節省珍貴遺傳資源(如瀕危物種精液、死亡個體冷凍樣本)。

生物學意義:ICSI不僅是受精失敗(如多精入卵、精子無能)的補救方案,更是研究受精機制與胚胎發育的關鍵實驗模型


二、標準化操作流程(以馬為例)

1. 卵母細胞采集與成熟

步驟技術要點成功率
活體卵巢穿刺(OPU)超聲引導經陰道穿刺卵泡,吸取卵丘-卵母復合體(COCs)60–70%獲卵率
體外成熟培養(IVM)未成熟卵子在含激素(FSH/LH)培養基中培養24–36小時至MII期50–60%成熟率

2. 精子處理與注射

  • 精子來源:新鮮精液、冷凍復蘇精液、附睪穿刺精子甚至死精(需化學激活)。

  • 注射關鍵操作

    • 精子制動:顯微zhen機械損傷尾部,增強受精能力。

    • 顯微注射:固定卵子→穿刺透明帶→注入精子(需<0.5 pL胞質抽吸驗證)。

       

3. 胚胎培養與移植

  • 體外培養:受精卵在KSOM/SOF培養基中培養至囊胚(約7–10天)。

  • 移植策略

    • 手術移植:早期胚胎植入受體輸卵管(高妊娠率但侵入性強)。

    • 非手術移植:囊胚期經宮頸植入子宮(主流趨勢)。


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