蛋白組學(xué)技術(shù)服務(wù)之iTRAQ

      iTRAQ（Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation）是一種用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的同位素標記技術(shù)**。這種技術(shù)使得研究者能夠同時對多達

8個不同樣本中的蛋白質(zhì)進行相對和絕對定量分析。iTRAQ技術(shù)自2004年由美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司推出以來，已成為蛋白質(zhì)組學(xué)研究的重要工具。下面將進一步探討

iTRAQ技術(shù)的工作原理、主要特點及其在科學(xué)研究中的應(yīng)用：

1. iTRAQ技術(shù)的工作原理

   標簽試劑結(jié)構(gòu)：iTRAQ試劑由三部分組成：報告基團、平衡基團和肽反應(yīng)基團。報告基團的質(zhì)量分別為113Da、114Da、115Da、116Da、117Da、118Da、

                          119Da和121Da（對于8-plex試劑），平衡基團則通過不同的質(zhì)量來確保所有標記肽段在一級質(zhì)譜中具有相同的總質(zhì)量[^1^][^2^]。

   一級質(zhì)譜：在不同樣本中的同一肽段被不同iTRAQ試劑標記后，由于總質(zhì)量相同，它們在一級質(zhì)譜中表現(xiàn)為一個峰。這樣可以將不同樣本中的同一肽段在質(zhì)譜圖中

                    合并為一個信號，簡化了后續(xù)的分析。

   二級質(zhì)譜：在二級質(zhì)譜分析中，iTRAQ標簽試劑化學(xué)鍵斷裂，釋放出報告基團的信號。這些信號的強度用于定量分析，而肽段碎片離子則用于定性分析。通過比較

                    不同報告基團的信號強度，可以獲得不同樣本中相同肽段的相對定量信息。

2. iTRAQ的主要特點

   高通量：iTRAQ技術(shù)能夠同時對多達8個樣本進行定量分析，大大提高了實驗通量。這使得研究者可以在單次實驗中比較多個條件下的蛋白質(zhì)表達差異。

   高靈敏度：相比傳統(tǒng)的二維凝膠電泳，iTRAQ能夠檢測到更低豐度的蛋白，并且能準確測量較小的蛋白變化（在1.3至1.6倍之間），從而提供了更高的靈敏度。

   廣泛的應(yīng)用范圍：iTRAQ不僅能夠檢測胞漿蛋白，還能檢測膜蛋白、核蛋白等。無論是高分子量、酸性、還是堿性蛋白，iTRAQ技術(shù)都能有效地進行鑒定。

   定性與定量同步：iTRAQ技術(shù)在一次實驗中即可完成蛋白質(zhì)的定性和定量分析，提高了實驗效率。

3. iTRAQ技術(shù)的應(yīng)用

   醫(yī)學(xué)研究：iTRAQ技術(shù)已廣泛應(yīng)用于腫瘤標志物的篩選，通過比較腫瘤組織和正常組織的差異蛋白，研究者能夠找到潛在的診斷和治療靶標。

   藥物作用機制：利用iTRAQ技術(shù)，可以篩選出與藥物作用相關(guān)的蛋白，進而研究藥物的作用靶點和機制。

   疾病機理研究：iTRAQ技術(shù)有助于揭示疾病的發(fā)生和進展機制，發(fā)現(xiàn)新的生物學(xué)標志物，為疾病的預(yù)防和治療提供新的思路。

          綜上所述，蛋白組學(xué)技術(shù)服務(wù)之iTRAQ在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中具有重要作用，其高通量、高靈敏度和廣泛的適用范圍使其成為研究蛋白質(zhì)表達差異的重要工具。

從醫(yī)學(xué)研究到藥物開發(fā)，再到環(huán)境科學(xué)，iTRAQ技術(shù)的應(yīng)用前景廣闊。研究者能夠更全面地了解蛋白質(zhì)在不同生理和病理條件下的動態(tài)變化，從而為生命科學(xué)研究和

相關(guān)應(yīng)用領(lǐng)域帶來新的見解和機遇。