伊人久久精品一区二区三区-大又大粗又爽又黄少妇毛片免费-欧美乱大交xxxxx疯狂俱乐部-国产成人av无码永久免费一线天-水蜜桃av无码-国产麻豆精品福利在线

咨詢熱線(微信同號)

18017847121

當前位置:首頁  >  技術文章  >  PCR反應混合物的分子實驗檢測步驟介紹

PCR反應混合物的分子實驗檢測步驟介紹

更新時間:2021-12-03      點擊次數:2286

進行分子實驗檢測時需要先準備PCR反應混合物:根據DNA樣本的數量來確定除了DNA外其他混合物的體積(額外增加一份來確保有足夠的PCR反應混合物),將擴增每一個遺傳標記并且在每一個PCR反應管內分19.5uL的反應混合物。
  配制膠溶液:將25g尿素、7.5mL40%丙烯酰胺:PDA(19:1)加入到250mL的錐形瓶中。加蒸餾水至50mL,充分混勻來溶解尿素(見注釋4)。
  準備制膠板:把膠板洗干凈,確保上面沒有灰塵,用硅化玻璃板。根據各個廠家的不同把玻璃板夾在一起并且用膠條封住底部(這一過程根據設備的不同而有所變化)。
  如果不用帶有加熱蓋的PCR儀,那么就需要在每個管子的頂部加入礦物油來防止液體蒸發。
  進行分子實驗檢測時在每個管子中加0.5的DNA樣本。
  把管子放在PCR儀中,95℃加熱3min變性DNA。
  95℃變性40s、55℃引物退火40s、72℃延伸40s,循環30-35次。
  把PCR產物和尿素上樣緩沖液1:1混合.
  加入500uL10%的過硫酸銨到膠混合液中并且通過濾紙過濾。
  取出10mL膠溶液加入到一個小燒杯中并且加10~15。馬上將膠倒到板上。幾分鐘之內膠將聚合到一起,封玻璃板的底部。
  封好膠后,加15ul到剩余的膠溶液中并且馬上把膠倒到兩塊膠板之間。仔細插入膠梳子,讓膠聚合2h至過夜。
  取下膠底部的封條。把膠放在電泳槽中確保電極插入的方向正確。將膠槽中灌滿(大約1.5L,根據裝置的不同量有所不同)。拔掉膠梳子,沖洗上樣孔。
  把膠預熱60min直到溫度在50℃左右。
  在上樣之前再次用加樣器沖洗上樣孔。在每個孔中加產物和上樣染料(上樣量根據梳子的大小和PCR產物的濃度而不同)。根據產物片段大小的不同跑膠時間可以從30min到3h之間變化。

上海達為科生物科技有限公司
  • 聯系人:張
  • 地址:上海市長江南路180號長江軟件園B區B637室
  • 郵箱:[email protected]
  • 傳真:
關注我們

歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息

掃一掃
關注我們
版權所有©2025上海達為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號:滬ICP備15041491號-2    sitemap.xml    總流量:156679
管理登陸    技術支持:化工儀器網    
主站蜘蛛池模板: 国产v亚洲v天堂无码久久久| 亚洲成av人影院| 久久色亚洲| 九九视频网| 日本高清在线看片免费视频| 国产亚洲精品久久久久5区| 99热精品在线| 精久久久| 天堂а√在线地址中文在线| 天天综合久久| 天天影院| 国产强被迫伦姧在线观看无码| 国产亚洲第一页| 九色91| 亚洲一级毛片免费看| 特黄大片又粗又大又暴| 激情.com| 国产美女视频网站| 五月婷婷综合激情网| 无码国产一区二区三区四区| 成人免费播放视频777777| 激情 婷婷| 欧美三级韩国三级日本三斤| 亚洲精品一区二区三区蜜桃久| 播播网色播播| 久久精品蜜芽亚洲国产a| 香蕉视频日本| 中文二区| 91精品国产综合久久久久久| 国产卡一卡二卡三| 亚洲成a人片在线观看久| 久操国产视频| 亚洲欧美影视| 国产sm调教视频在线观看| 亚洲熟妇无码爱v在线观看 | 成人午夜精品视频在线观看| 国产拍拍拍无码视频免费| 江苏少妇性BBB搡BBB爽爽爽| 男女一进一出视频| 亚洲 欧美 自拍偷拍| 自偷自拍三级全三级视频|